實驗接種操作中常見問題匯總及分析

發(fā)布時間：

2023-11-18 14:51

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記住下面這十條小訣竅讓您在實驗接種操作中輕松實驗！

一、劃不出單個菌落怎么辦？

（1）平板上有過多的水分。

（2）劃線時接種環(huán)未經反復灼燒。

（3）多區(qū)劃線，三區(qū)或四區(qū)劃線。

二、培養(yǎng)基配制時應注意的問題

（1）滅菌溫度要嚴格控制，按照要求滅菌，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應太高，過高會導致糖分焦化，影響質量。

（2）瓊脂培養(yǎng)基不能反復溶化。反復溶化會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。

（3）培養(yǎng)基不能反復滅菌，反復滅菌也會導致營養(yǎng)成分的破壞。

（4）含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后，要搖勻。

三、平板的保存

大多數平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。

四、產品的保存

（1）干粉培養(yǎng)基：避光干燥，結塊后不能使用。

（2）亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時，要常溫解凍，避免水浴加熱。

（3）抗生素類：冷藏保存，溫度過高會導致靈敏度的下降。

（4）兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會影響結果。

五、觀察時間的掌握

按GB等標準或培養(yǎng)基的使用說明所述時間進行觀察，時間過短或時間過長，單菌落的特征都不會很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基，時間短單菌落看不到卵磷脂環(huán)，時間長綿羊李氏菌也會產生沉淀環(huán)。PALCAM的觀察也如此，時間過長，李氏菌使整個平板成黑色，不利于觀察單個菌落。

六、添加劑的添加

（1）溫度的掌握。卵黃和抗生素類添加的溫度都不應太高。

（2）定量。過多會抑制一些目標菌，太少又導致雜菌的過度生長。

七、培養(yǎng)溫度的掌握

（1）真菌類。25-28℃培養(yǎng)。

（2）細菌類。李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。

（3）其他一般在36℃左右。

八、接種方法

常用的方法主要有劃線、三點接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

九、革蘭氏染色方法

染色時間的掌握、沖洗的方法。

十、生化實驗